Un factor importante en la espectrofotometría es la absorción de luz, que permite un análisis cualitativo y cuantitativo sencillo.
Entonces, al realizar espectrofotometría, se requiere el uso de un espectrofotómetro, ya que está construido con un espectrómetro y un fotómetro.Otros componentes de un espectrofotómetro incluyen una fuente de luz (monocromador), una cubeta y un detector de luz y un software de análisis de datos.
Aplicación del espectrofotómetro
-Química
-bioquímica (para reacciones catalizadas por enzimas)
-Física
- Biología
-estudios clínicos
Las pruebas de la calidad del agua se han simplificado mediante un espectrofotómetro.Qué tan segura es el agua para beber, qué tan pura y clara es, qué propiedades contiene, etc. Todo esto se puede comprobar de forma rápida y económica mediante un espectrofotómetro.
Antes de que los medicamentos se entreguen a la sociedad para su uso, es necesario pasar por algunas pruebas rigurosas para garantizar que funcionan para el propósito para el que fueron creados.Un espectrofotómetro ha demostrado ser una forma de hacer esto que ahorra tiempo y dinero.
Tipos de espectrofotómetro
Hay dos tipos principales de espectrofotómetros, a saber, el espectrofotómetro de haz único y el espectrofotómetro de haz doble.Estos dos espectrofotómetros pueden realizar diferentes tipos de análisis y no vienen con las mismas especificaciones.
El espectrofotómetro de haz único
El espectrofotómetro de haz único está diseñado para emitir luz a través de una muestra proporcionando un haz.Este espectrofotómetro está diseñado para análisis más detallados y se prefiere para proporcionar una tasa dinámica más alta.Su diseño también es compacto, lo que significa que se pueden mover fácilmente.
El espectrofotómetro de doble haz
Este tipo de espectrofotómetro está diseñado teniendo en cuenta la precisión, ya que puede emitir haces duales, que realizarían funciones especiales para ayudar a llegar a un informe más definido y preciso.Entonces, en este caso, su automatización es más fluida debido a su configuración de procedimiento dual.
Más tipos:
Espectrofotómetro de fluorescencia
-Espectrofotómetro de absorción atómica.
-Micro espectrofotómetro
-Espectrofotómetro visible
-Espectrofotómetro UV-VIS
Nivel de absorbancia y transmitancia.
El usuario puede controlar la temperatura de un baño María de laboratorio de serología mediante una interfaz digital o analógica.Por lo general, una luz indicará que el baño de agua está funcionando y, una vez que se haya alcanzado la temperatura correcta, el baño de agua se encenderá y apagará para mantener la temperatura constante.Ciertos baños de agua de laboratorio tienen un ajuste de seguridad que impide que el agua se caliente a una temperatura más alta.
También existen diferentes tipos de baños de agua de laboratorio, por ejemplo, baños de agua con agitación, que se utilizan para mezclar sustancias y tienen controles adicionales que permiten a los usuarios controlar la velocidad y la frecuencia de los movimientos.Los baños de agua de laboratorio no necesitan contener agua y pueden utilizar fluidos alternativos como aceite dependiendo de la temperatura y viscosidad requeridas. Al realizar su proceso, el espectrofotómetro necesita conocer el nivel de absorbancia y transmitancia de la solución.Entonces, cuando la luz pasa, el nivel de absorbancia y transmitancia determinaría el proceso que el científico necesitaría seguir para que su análisis fuera preciso.Por eso se utiliza una cubeta como recipiente de muestra, para saber qué tan bien absorbería la luz.
Sin embargo, la transmitancia del proceso debe calcularse utilizando la siguiente ecuación:
Transmitancia (T) = It/I0
It = Intensidad de la luz después de pasar la cubeta (luz transmitida)
I0 = Intensidad de la luz antes de pasar la cubeta (luz incidente)
Absorbancia (A) = – log10 T = – log IS/IR
Además, la absorbancia se puede medir con esta ecuación, combinando la ley de Beer-Lambert y el espectrofotómetro: A = ƐCL.
A = absorbancia de la luz a una longitud de onda específica
Ɛ = coeficiente de extinción molar (la absorbancia de 1 mol de una sustancia disuelta en 1 litro de disolvente)
C = la concentración molar de una muestra
L = la longitud del camino óptico de una muestra.
Medición de la absorción con un espectrofotómetro
Para ello, es necesario obtener más información sobre el valor del coeficiente de extinción molar, la longitud del camino óptico y la concentración molar.
Coeficiente de extinción molar: Ɛ es el valor en el que la luz en una longitud de onda determinada se acentúa con la solución química.
La unidad SI es m2/mol, pero a veces se expresa como M-1 cm-1 o L mol-1 cm-1.El coeficiente de extinción molar también se puede derivar de fuentes bibliográficas en bibliotecas y en línea.
