Directrices de laboratorio para la detección de la infección por el virus de la viruela del simio

El Director General de la Organización Mundial de la Salud (OMS) declaró el creciente brote mundial de viruela simica una Emergencia de Salud Pública de Importancia Internacional (ESPII) el pasado 23 de julio de 2022. Según la OMS, hay más de 35.000 casos en 92 países/territorios, y 12 muertes al 17 de agosto. La mayoría de los casos reportados (con historial de viajes) viajaron a áreas de Europa y América del Norte.

La viruela de los monos es una enfermedad rara causada por la infección con el virus de la viruela de los monos (MPXV), un virus de ADN bicatenario envuelto que pertenece a la misma familia de virus que causan la viruela.Este virus puede transmitirse por contacto con fluidos corporales, lesiones en la piel o superficies mucosas internas con síntomas como fiebre, dolor de cabeza y dolores musculares.El período de incubación de la viruela del simio suele ser de 6 a 13 días, pero puede variar de 5 a 21 días (unas tres semanas).
Según la OMS, las mejores muestras de diagnóstico son las obtenidas directamente de la erupción: piel, líquido o costras, o una biopsia cuando sea viable.Otros métodos, como la detección de antígenos y anticuerpos, pueden no ser útiles ya que no distinguen entre ortopoxvirus.

Se recomienda un enfoque basado en el riesgo al manipular las muestras de casos sospechosos, probables o confirmados de viruela simica en el laboratorio.Por lo tanto, los procedimientos para detectar la presencia del MPXV, que está categorizado como patógeno del grupo de riesgo 3, deben realizarse en un laboratorio de Nivel de Bioseguridad 2 utilizando la lista de equipos que se muestra a continuación.

Guía de equipos para la detección del virus de la viruela del simio

Almacenamiento de muestras y reactivos

Se recomienda refrigerar las muestras MPXV entre 2 °C y 8 ​​°C o congelarlas (-20 °C o menos) dentro de una hora después de su recolección.Si el tiempo de transporte excede los siete días, las muestras deben almacenarse a -20 °C o menos.Mientras tanto, se recomienda una temperatura de -70 °C para el almacenamiento de muestras a largo plazo (>60 días desde la recolección).

Los refrigeradores de laboratorio, los congeladores de laboratorio y los congeladores de temperatura ultrabaja de Biobase están equipados con sistemas de refrigeración bien diseñados y materiales de alta calidad adecuados para el almacenamiento de muestras biológicas sensibles a la temperatura que requieren condiciones de almacenamiento críticas.

Manejo y preparación de muestras

MPXV puede transmitirse durante la etapa de procesamiento de muestras debido a material contaminado o métodos inadecuados.Por lo tanto, se deben observar mayores medidas de bioseguridad.Antes de la inactivación de la muestra, las muestras de pacientes con sospecha de MPXV deben prepararse en una cabina funcional de bioseguridad de Clase II;sin embargo, esto no es necesario para muestras adecuadamente inactivadas.

Además de la protección que brindan los gabinetes de bioseguridad, los gabinetes de seguridad biológica Biobase Clase II cumplen con NSF 49 y EN 12469 con características fáciles de usar y están recubiertos con polvo antimicrobiano en todas sus superficies pintadas externas e internas para mejorar la seguridad.Las centrífugas son necesarias para la separación de los componentes líquidos y sólidos de la muestra.Se recomiendan copas de seguridad o rotores sellados si son esenciales para el procedimiento.

Detección y Análisis

Se realizan pruebas de amplificación de ácidos nucleicos (NAAT) para confirmar la infección por MPXV.Para detectar secuencias de ADN viral únicas, se utiliza PCR en tiempo real o reacción en cadena de la polimerasa (PCR) convencional.Hay dos pasos involucrados en la detección de virus.La primera PCR detecta ortopoxvirus pero no identifica la especie, mientras que la segunda PCR (o secuenciación) detecta específicamente MPXV.

Un termociclador de PCR en tiempo real proporciona una amplificación eficiente de ácidos nucleicos para el análisis de virus.Biobase ofrece los nuevos cicladores térmicos de PCR Swift™ con una computadora incorporada para operación independiente desde la entrada, el monitoreo y el análisis del programa de PCR.